LAPORAN PERCOBAAN 12 PEMBUATAN KROMOTOGRAFI KOLOM

 

Laporan Akhir Hasil Praktikum Pembuatan Kromotografi Kolom

PEMBUATAN KROMOTOGRAFI KOLOM

 

        NAMA   : CYNTIA WIDI UDYA

                                                           NIM        : A1C119011

 

DOSEN PENGAMPU: 

Dr. Syamsurizal., M.Si 

 

 

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA 

JURUSAN PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM 

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN 

UNIVERSITAS JAMBI

2021

VII. DATA PENGAMATAN

Prosedur	Fungsi Alat dan Bahan	Tujuan	Hasil
Kromotografi Kolom Bagian 1 1). Siapkan 4 bejana KLT yang diisi dengan 4 fase gerak yang berbeda 2). Siapkan 4 plat KLT dengan ukuran 3 x 10 cm, beri tanda batas bawah 1,5 cm dan batas atas 0,5 cm 3). Siapkan larutan baku EPMS dan larutan sampel ekstrak rimpang kencur 4). Totolkan larutan baku EPMS sebanyak 2 miu L dan ekstrak rimpang kencur sebanyak 4 miu L pada masing-masing plat KLT 5). Buat jarak antar noda 1,5 cm. usahakan diameter noda yang terbentuk tidak lebih dari 0,3 cm 6). Masukkan plat KLT pada bejana  yang sudah dijenuhkan 7). Eluasi hingga batas atas plat KLT 8). Visualisasi plat KLT dibawah UV 254 nm 9). Beri tanda noda yang terlihat dan hitung derajat keterpisahan alpha dari EPMS terhadap noda terdekat.	Bejana KLT, fungsi : wadah tempat fase gerak Plat KLT, fungsi : tempat fase diam Larutan baku EPMS,fungsi: Larutan ekstrak rimpang kencur : sebagai sampel	Disiapkan KLT bejana dengan tujuan untuk dijenuhkan             Disiapkan larutan untuk ditotolkan ke plat KLT     Ditotolkan untuk memberi noda pada plat KLT                     Dimasukkan agar terjadi elusi               Diberi tanda untuk menandakan noda dan mempermudah perhitungan	Berdasarkan hasil KLT fase gerak yang dipilih adalah : 1. Derajat keterpisahan antara senyawa target (EPMS) dengan noda terdekat adalah alpha lebih besar sama dengan 1,5 2. Tidak tailing 3. Nilai RF senyawa target (EPMS) 0,4-0,5
Kromotografi Kolom Bagian 2 1). Timbang silica gel sebanyak 50 gram 2). Masukkan silica gel kedalam labu Erlenmeyer 3). Tambahkan fase gerak terpilih hingga semua silica gel terbasahi 4). Aduk dengan batang pengaduk 5). Tutup dengan aluminium foil   6). Goyangkan labu Erlenmeyer untuk membantu supaya silica gel terbasahi secara merata dengan eluen 7). Tuangkan campuran silica gel dan eluen kedalam kolom dengan bantuan corong gelas 8). Buka stopper dibagian bawah kolom untuk mengeluarkan eluen 9). Jika masih ada sisa silica gel didalam labu Erlenmeyer, ditambahkan lagi eluen dan masukkan kedalam kolom 10). Tutup stopper dibagian bawah kolom 11). Pastikan eluen dalam kolom terisi penuh, kemudian tutup dengan aluminium foil dan rekatkan dengan karet gelang 12). Diamkan selama 1-2 jam sebelum digunakan (pada praktikum kali ini kolom dibiarkan selama 7 hari sebelum digunakan) 13). Siapkan 0,5 gram ekstrak rimpang kencur dan 0,5 gram silica gel 14). Tambahkan silica gel sedikit demi sedikit kedalam ekstrak 15). Aduk dengan spatula hingga homogen dan ekstrak menjadi kering (menjadi serbuk) 16). Buka penutup aluminium foil dari kolom 17). Keluarkan eluen dari kolom dengan cara membuka stopper dari bagian bawah kolom 18). Keluarkan eluen hingga batas 0,5 cm dari permukaan atas fase diam 19). Tutup stopper   20). Masukkan sampel kering kedalam kolom dan pastikan sampel terdistribusi merata diatas kolom 21). Siapkan silica gel sebanyak 0,5 gram dan masukkan kedalam kolom   22). Tambahkan eluen melalui dinding kolom dengan bantuan pipet Pasteur 23). Alirkan eluan dan tampung dalam baker 24). Beberapa ml eluan yang keluar pertama kali dari kolom belum mengandung senyawa kimia dari ekstrak, oleh karena itu tampungan ini bisa dibuang 25). Umumnya sekitar 50% dari volume kolom 26). Selanjutnya tampung fraksi dalam fial yang sudah ditara sebanyak 10 ml dan sudah ditandai dengan nomor 27). Atur kecepat alir 1 tetes per detik 30). Jika sudah penuh 10 ml ganti dengan vial berikutnya 31). Tutup vial dengan aluminium foil dan lubangi atasnya dengan bantuan jarum 32). Biarkan hingga Sebagian besar eluen menguap.	Silica gel, fungsi : sebagai fase diam Labu erlenmeyer , fungsi : tempat campuran silica gel dan fase gerak Batang pengaduk, fungsi : mempercepat campuran silica gel dan fase gerak Alumunium foil , fungsi : menutup labu erlenmeyer Kolom, fungsi : tempat terjadinya pemisahan Corong gelas,fungsi : alat bantu memindahkan silica gel dan eluen Karet gelang, fungsi : merekatkan aluminium foil sebagai penutup Eluen, fungsi : sebagai fase gerak Pipet Pasteur, fungsi : alat membantu memindahkan eluen Beker, fungsi : tempat menampung eluen Jarum, fungsi : melubangi aluminium foil	Untuk mempersiapkan silica gel     Ditambahi fase gerak dengan tujuan agar silica gel basah   Diaduk dengan tujuan agar larutan homogen Ditutup dengan tujuan agar larutan tidak terkontaminasi Digoyangkan dengan tujuan agar silica gel homogen dengan uluen   Untuk mempersiapkan langkah selanjutnya     Dibuka dengan tujuan untuk mengeluarkan eluen               Untuk memberhentikan keluarnya eluen Hal ini untuk memastikan agar kolom tidak kering selama penyimpanan                       Untuk mempersiapkan sampel percobaan   Ditambahkan untuk mencampurkan kedua sampel   Diaduk dengan tujuan agar homogen dan terbentuk serbuk     Untuk melakukan pemisahan kromatografi kolom Mengeluarkan eluen hingga batas 0,5 cm dari atas fase diam             Menghentikan kalurnya eluen Untuk mencampurkan sampel       Hal ini untuk melindungi ekstrak supaya tetap rata pada saat ditambahkan eluen Untuk mencampurkan sampel   Dialirkan agar eluen keluar   Hasil eluen yang ditampung dibuang karena mengandung senyawa kimia dari ekstrak               Untuk memisahkan fraksi ke dalam fial-fial yang sudah dipersiapkan               Ditutup dengan aluminium dan dilubangi dengan bantuan jarum dengan tujuan agar eluen menguap	Berdasarkan  hasil KLT dari 4 fase gerak (video kromotografi kolom bagian 1) diperoleh fase gerak terpilih adalah n-heksana : etil asetat (4 : 1) Kombinasi ini terpilih karena : 1. Derajat keterpisahan antara senyawa target EPMS dengan noda terdekat adalah alpha lebih besar sama dengan 1,5 2. Tidak tailing 3. nilai Rf senyawa target (EPMS)  0,4-0,5.   Setelah beberapa hari tampungan akan menguap , jika hasil tampungan mengering maka perlu ditambahkan eluen beberapa tetes

 

VIII. PEMBAHASAN

          Proses pada sampel kolom merupakan suatu proses pada kromotografi yang dimana zat-zat pada adsorbsinya mempengaruhi hasil dari suatu resolusinya terhadap suatu zat terlarutnya dan juga hasil akhir dari sampel tersebut dinamkan dengan suatu kromotogram. Metode yang digunakan pada percobaan kali ini adalah metode kromotografi kolom yang sering sekali digunakan dikarenakan dapat dengan mudah untuh menjadi pemisaha antara senyawa yang digunakan dengan porsi yang banyak.

          Kromotografi kolom pada percobaan ini memiliki prinsip yang berupa komponeen kimianya akan terjadi suatu peristiwa yang berupa terdapatnya suatu fase gerak dan fase diam yang dapat berelusi. Eluen dalam kromotografi kolom ini menjadi suatu penetralisasi yang akan berperan dalam suatu silica gel didalam proses fase diam yang akan diisolasi.

          Percobaan ini menggunakan suatu metode dalam kromotografi kolom yang berupa menggunakan suatu metode basah, ddipakainya atau dipilihnya cara basah pada percobaan ini dikarenakan cara basah memiliki keefektifan yang banyak daripada dengan metode kromotografi kolom lainnya. Nah eluen akan dilarutkan untuk dapat memisahkan suatu komponen pada suatu kecepatan yang memiliki suatu gerakan yag tinggi pada setiap permenitnya.

          Pada suatu proses yang terjadi didalam silica yaitu dapat dikatakan sebagai suatu proses pengemasan dengan suatu cara yang sudah ditentukan oleh praktuikan yaitu menggunakan cara basah dengan. Proses tersebut terjadi apabila silica gel dicampurkan dengan ditambahkan suatu pelarut kedalam suatu gelas kimia dan diaduk sampai akhirnya pelarut tersebut menutupi pori-pori yang terbuka tersebut dari suatu silicanya.

IX. PERMASALAHAN

1). Jelaskan mengapa pada roses pengemasan silica gel harus menunggu pori-pori dari pelarut menutup?

2). Mengapa eluen harus dialirkan pada kecepatan yang tinggi?

3). Ketika eluen mengalir mengelusi sampai menyusuri fase, kenapa harus memanfaatkan gaya gravitasi?

X. KESIMPULAN

          Berdasarkan percobaan yang telah dilakukan maka dapat ditarik kesimpulan

Kromotografi kolom adalah suatu metode pemisahan fisik yang dimana komponen-komponenya dilakukan dengan cara pemisahan dan akan didistribusikan diantara dua fase, yaitu fase diam danfase gerak. Yang dimana fase diamnya berupa zat dalam bentuk padat dan fase geraknya berupa zat dalam bentuk cair ataupun gas. Metode kromotografi ini dapat menganalisis suatu senyawa berdasarkan kualitatif ataupun kuantitatif. Kelebihan dari metode kolom ini sendiri karena banyak digunakan oleh orang dikarenakan dapat digunakan sebagai analisi dan aplikasi preparative serta dapat menentukan sejumlah komponen dalam senyawa dan sebagai pemisahan dan purivikasi yang dapat membuat kolom sesuai dengan sampelnya.

XI. DAFTAR PUSTAKA

Kasiman. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Jakarta : Erlangga.

Khopkar. 2008. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta : UI-Press.

Najib. 2013. Analisis Kimia Kuantitatif. Jakarta : Erlangga.

Sudjadi. 1986. Kimia Analisis Kunatitatif Organik. Jakarta : Kedokteran EGC.

Sarker. 2006. Pengantar Kromotografi. Bandung : ITB.